转自：ACROBiosystems官方

CAR-T细胞治疗中的关键角色：

柔性Linker

近年来，CAR-T（嵌合抗原受体T细胞）疗法因其在治疗复发难治性血液肿瘤方面展现出显著疗效，成为最受关注的免疫细胞治疗技术之一。CAR的基本结构包括四个核心部分：胞外抗原识别结构（scFv）、铰链区域、跨膜结构域及胞内信号转导区域。其中，Linker作为scFv中的可变重链（VH）与可变轻链（VL）之间的柔性桥梁，尽管体积较小，却在保持抗体构象稳定、增强亲和力、避免空间位阻等方面发挥着关键作用。

目前最常用的柔性Linker包括G4S Linker与Whitlow/218 Linker。其中，218 Linker由Whitlow等人于1993年首次报道，其氨基酸序列为GSTSGSGKPGSGEGSTKG。该Linker因其良好的柔性和稳定性，被广泛应用于各类CAR构建中。它能够促进VH与VL以正确构象折叠，从而提高scFv的功能稳定性，减少聚集及降解现象，进一步提升CAR-T细胞的表达效率、体内持久性与抗肿瘤活性。

CAR表达检测：

CAR-T疗效评估与质量控制的核心

随着CAR-T疗法逐步走向临床，其产品开发过程对质量控制提出了更高要求，其中一个关键环节便是CAR表达水平的检测。CAR表达检测可用于定量分析CAR-T细胞中CAR的表达水平，即CAR阳性率，这是评估CAR-T细胞产品活性的重要指标。CAR阳性率会直接影响CAR-T细胞对肿瘤靶点的识别能力与杀伤效应，只有达到足够的阳性率，CAR-T细胞才能有效介导抗肿瘤反应。此外，在CAR-T细胞回输患者体内后，检测其在外周血或组织中的CAR表达情况，有助于评估细胞的扩增能力和在体内的持久性，对判断治疗反应、疗效持续时间乃至复发风险具有重要参考价值。同时，动态监测CAR-T细胞的表达变化，还可用于评估其潜在免疫原性，及时发现可能出现的安全风险，如细胞脱靶或过度激活等。因此，建立一套灵敏、可靠且通用的CAR表达检测体系，对于CAR-T疗法的临床评估和产品开发至关重要。

抗218 Linker 抗体：

高效CAR检测利器

为了实现高效、标准化的CAR检测，近年来一些新型的通用检测工具，如针对CAR结构中linker区域开发的特异性抗体逐渐火热。其中，针对218 Linker序列开发的218 Linker抗体因其高特异性和广泛适用性而受到广泛关注。218 Linker作为一种常见的柔性连接肽段，广泛应用于多种CAR构建中，其标准化的氨基酸序列为检测提供了明确靶标。利用218 Linker抗体，无论CAR-T的scFv识别的是CD19、BCMA、Mesothelin或其他肿瘤抗原，只要其结构中包含218 Linker区域，均可实现稳定、准确的检测。相比依赖scFv抗原特异性检测的方法，这种策略显著提升了检测的通用性和一致性，为CAR-T产品的质量控制、功能验证及体内追踪等环节提供了一种通用、高效的检测工具。

ACROBiosystems百普赛斯全面布局CAR阳性率检测产品线，除了抗218 Linker 抗体、抗G4S linker抗体外，还可提供50多种CAR靶点抗原蛋白(覆盖PE/FITC/APC/AlexaFluor等荧光标记类型)、高灵敏抗独特性抗体、Protein L等，满足早期研究、CMC质控、临床等不同阶段对CAR检测试剂的不同需求，获得了全球多家客户的高度认可并达成长期合作。

新品上市：

兔抗Whitlow/218 Linker抗体

ACROBiosystems百普赛斯全新推出通用型CAR检测工具——兔抗Whitlow/218 Linker抗体，经FACS流式验证，可高特异、高灵敏结合含Whitlow/218 Linker的CAR细胞，具有高普适性，全面助力细胞疗法药物的开发进程。

产品优势

• 多靶点通用：专一结合VL-VH间的Whitlow/218 linker，不区分靶点；

• 多CAR结构通用：专一结合VL-VH间的Whitlow/218 linker，适用于绝大部分CAR结构；

• 种属、亚型通用：不受抗体亚型和种属限制；

• 体内外通用：不受抗原封闭和血清影响；

• 高亲和力：自研单B兔抗开发平台；

• 高特异性：PBMC非特异结合低于0.5%。

• 经类CAR细胞批检放行

Flow cytometric analysis of Anti-BCMA (C11D5.3) CAR 293 cells staining with PE-Labeled Monoclonal Anti-Whitlow 218 linker Antibody, Rabbit IgG (P3C09) at 1:50 dilution (2 μL of the antibody stock solution corresponds to labeling of 1e6 cells in a final volume of 100 µL). PE signal was used to evaluate the binding activity (QC tested).

• 极低非特异信号：经PBMC双染验证

Non-specificity of PE-Labeled Monoclonal Anti-Whitlow 218 Linker Antibody binding to CD3+ cells present in human PBMC. 5e5 of human PBMCs were simultaneously stained with APC-Labeled Monoclonal Anti-Human CD3 Antibody and PE-Labeled Monoclonal Anti-Whitlow 218 Linker Antibody, Rabbit IgG (P3C09) (2 μL of the antibody stock solution corresponds to labeling of 5e5 cells in a final volume of 100 µL) and washed and then analyzed with FACS. Both APC and PE positive signals was used to evaluate the non-specific binding activity to human CD3+ cells (QC tested).

• 阳性信号高于竞品

Flow cytometric analysis of Anti-BCMA (C11D5.3) CAR 293 cells staining with PE-Labeled Monoclonal Anti-Whitlow 218 Linker Antibody, Rabbit IgG (P3C09) at 1:50 dilution (2 μL of the antibody stock solution corresponds to labeling of 1e6 cells in a final volume of 100 µL) and Competitor C. PE signal was used to evaluate the binding activity. The biological activity level of 218-PCFMY3 is superior to Competitor C (Routinely tested).

（转自：ACROBiosystems官方）